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細胞株的傳代事項說明看仔細!

原載自:m.wtzww.cn[行情動態]  2020-01-16  瀏覽次數:1351

   細胞株即為從組織中分離的原代培養物經*傳代培養成功后即成細胞系;通過選擇和克隆形成以原代培養物或細胞系中獲得的具有特殊性質或標志的培養物。
  細胞株的傳代分析:
  消化細胞制備細胞懸液,根據稀釋比例和試驗需要,將等比例的細胞懸液分別加入新的細胞培養瓶中,并加入適量的細胞培養基進行細胞培養,并記錄相關的記錄中。
  備注:細胞培養基中的血清比例可以根據細胞生長狀態在5%-20%范圍進行調整。傳代的比例(稀釋比例)建議在1/3-1/10之間。
  1.直接傳代法
  ①待懸浮細胞長滿至80%-90%(細胞懸液變黃),即可傳代;
  ②用吸管吸棄細胞懸液1/2-1/3;
  ③加入適量的新鮮培養基,繼續培養。
  2.離心傳代法
  ①將細胞懸液轉移到離心管內;
  ②150g離心5min,棄去上層清液;
  ③使用新鮮的培養基重懸細胞;
  ④吸管吸取適量細胞懸液,裝入新的培養瓶,再加入適量的新鮮培養基,繼續培養。
  注意事項:
  1.嚴格的無菌操作。
  2.細胞消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養瓶中的量等諸多因素的影響,消化過程中應該注意培養細胞形態的變化,一旦胞質回縮,連接變松散,或有成片浮起的跡象就要立即終止消化。
  3.傳代細胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次只進行一種細胞的操作,每種細胞使用一套器材。避免交叉感染。
  4.傳代細胞瓶口每次打開或者關閉都需要在酒精燈上消毒。

 

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