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ATCC細胞接收操作

原載自:m.wtzww.cn[行情動態]  2017-12-11  瀏覽次數:1487

   ATCC細胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得的具有特殊性質或標志的培養細胞。從培養代數來講,可培養到40-50代。細胞株的特殊性質或標志必須在整個培養期間始終存在。對于人類腫瘤細胞,在體外培養半年以上,生長穩定,并連續傳代的即可稱為連續性株或系。
  ATCC細胞接收操作:
  1.由于細胞運輸途中存在較多不可控因素(如溫度變化,強烈振蕩,時間較長,生長條件不適宜),可能出現漏液,污染,細胞漂浮及死亡等狀況,因此請務必在收到細胞當天提供原始細胞圖片。
  圖片拍攝步驟:收到細胞快遞當日必須先著重對培養基拍*組照片,觀察是否有漏液和培養基是否顏色變渾濁,是否變異常,并顯微鏡下拍細胞100X,200X各兩張,拍攝照片應清晰;第二組照片,未開瓶蓋、未做任何處理把細胞培養瓶靜置在培養箱2--4h后進行拍攝;第三組照片,細胞*次傳代后,如果細胞有問題,要每天都有照片記錄下來提供給甲方。
  根據提供的圖片,本公司技術人員分析細胞確有問題,承諾免費提供一次;若未在規定時間限制內提供相關圖片,默認收到細胞時細胞正常。
  2.由于運輸過程中的問題,細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況,這時請在拍照后將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的*培養基到新的培養皿/瓶繼續培養3天;同時原培養瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養基,培養3天,3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現增殖而是繼續脫落死亡,請提供細胞圖片跟進解決。(這里是針對原來*培養基FBS濃度是10%的情況,如果原來FBS濃度是20%,可以增加到25%FBS濃度)
  3.收到細胞時若無以上兩種異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,若為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中的培養液吸出,留5ml左右培養基(T25細胞培養瓶)繼續培養;超過80%匯合度時,請按照細胞培養條件進行傳代培養。
  4.收到細胞,原瓶中的培養液若顏色正常,可以收集繼續使用,在*次消化傳瓶時,建議留一瓶細胞繼續使用我們的培養液,其他瓶的細胞可使用客戶自己的培養液進行培養,這樣可以減少由于細胞不適應培養液導致的問題,請按照細胞處理方法進行操作。
  ATCC細胞株配制注意事項
  1.細胞株經滅菌后,必須放在37C溫箱培養24h,無菌生長者方可使用。
  2.ATCC細胞株一般不需要調pH。對于要調節pH的細胞株,一般用pH試紙測定其pH。如果細胞株偏酸或偏堿時,可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液進行調節。調節時應逐滴加入NaOH或HCl溶液,防止局部過酸或過堿破壞細胞株成分。
  3.細胞株在使用時也可以做成不含瓊脂的液體細胞株,用于菌類的震蕩培養。
  4.ATCC細胞株也可以加入氯霉素或土霉素,加入量為0.2g/L細胞株,主要是為了抑制細菌的生長,減少干擾性。

 

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